切片-求精教学-植物细胞有丝分裂切片

生物上的切片、装片、涂片分别是什么

从生物体上撕下或挑取少量材料制成的玻片标本叫做装片。

切片——用从生物体上切取的薄片制成；

涂片——用液体的生物材料经过涂抹制成；

装片——用从生物体上撕下或挑取的少量材料制成。

显微镜成像是利用光学原理，必须使可见光线穿过被观察的物体，如果不透光就不能成像，因此显微镜观察的材料一定是薄而透明的，制作的切片、涂片、装片，需要放在显微镜下观察，所以制作切片、涂片、装片时，观察的标本一定是薄而透明，植物细胞有丝分裂切片，有些还需要染色。

涂片检查中未检出致病菌，单层上皮切片，条件致病菌数量及所在部位应该正常。

临床意义

异常结果：

一、异常白细胞形态：

（1）中性粒细胞的毒性变化，多见于严重，密切观察白细胞数量及中性粒细胞的毒性变化对判断的程度、抵*能力和判断预后有重要的临床价值。

（2）中性粒细胞的其它异常变化。

1、巨多分叶核中性粒细胞——多见于巨幼细胞缺血。

2、棒状小体——主要见于急性非淋巴细胞。

3、异形淋巴细胞多是与遗传有关的异常形态变化。

4、涂抹细胞或蓝状细胞，见于淋巴细胞白细胞。

二、白液系统疾病可影响到红细胞的质量特别是缺血，不仅其红细胞的数量和血红蛋白浓度降低，而且会有相应特异的红细胞形态改变，表现在红细胞大小、性状、染色性质和内涵物的异常。

结晶紫染色法测定细胞数

1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%的RPMI-1640培养液)，37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时，让细胞帖壁。

2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品，根据需要3~5倍递次稀释待检样品，蝗虫精母细胞切片，每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品，切片，每个稀释度3个重复孔。对照孔6个，3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液，3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18~24小时。

3.甩去培养液，用PBS小心洗涤一次，每孔加0.1ml 10%溶液固定细胞30秒钟。

4.吸去溶液，每孔加0.1ml结晶紫染液，室温中放置20分钟。

5.轻轻甩去染色液，用蒸馏水洗涤各孔，将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。

6.测定前，每孔加0.1ml 33%醋酸脱色，充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度(OD)值对样品稀释度作图，比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞活性