生物切片_生物切片设备_求精教学

下面从原理方面简要介绍几种常用的*化学染色技术：

1、显示琥珀酸脱氢酶（SDH）活性的硝基-BT法：

（Succinate dehydrogenase）

⑴酶的*及生物学意义：

琥珀酸脱氢酶是线粒体标志酶，其存在于所有有氧呼吸的细胞，和线粒体内膜紧密结合。该酶不需辅酶而自身有黄素蛋白（FP,Fl*oprotein）为辅基。在组化反应中常用来反映三羧酸循环的情况。

⑵原理：上述的反应****后一步的原理是，硝基-BT（Nitro-blue tetrozolyum，四唑氮蓝）系异环族化合物四唑盐，当它接受氢时，本身被还原为有色沉淀产物（甲）（Formazan）。

*切片法很多种，石蜡切片是病理诊断****常用的切片制作方法，称为常规石蜡切片法，即将经石蜡包埋后制成的*是蜡块，用切片机制成切片的过程。切片的厚度一般在3-5um，特殊情况，可切1-2um，具体步骤如下：

　　①将已修好、固定于支持器上（一般为木制品，习惯成为“木托”），并经冷却的*块，安置在切片机的机头处。将切片刀装在刀架上，调整刀刃与蜡块至合适位置，使刀刃与蜡块呈5o-10o夹角。

　　②仔细移动刀架或蜡块支持器，使蜡块与刀刃接触，旋紧刀座和蜡块支持器。

　　③使蜡块的厚度为15-20um，用右手迅速旋转切片机轮，修切*块表面，直到全部暴露*块切片为止。但小标本不要修的太多，以免将有诊断价值的病变修掉。

包埋

　　①包埋一般用硬蜡，即熔点为60-62℃的石蜡。包埋用的石蜡熔点要和浸蜡用的石蜡熔点相一致。

　　②包埋用的石蜡温度药稍高于浸蜡的温度，维持在65-68℃，但是不可过高，否则易造成*的*，而实验结果。

　　③包埋过程操作要迅速，以免在*块尚未埋妥前熔蜡凝固。

　　④黏膜、囊壁、皮肤*必须垂直于包埋盒的地面包埋，习惯称为立埋或立包。血管壁也应立埋。

切片

　　①切片刀要锋利，刀口无缺损，才能切出完整的薄片。目前多用一次性刀片切片，切片质量良好。若用重型全****，则要经常研磨，以保持其锋利、无缺损。

　　②骨与其它钙化*必须先脱去钙盐，再经述各步骤处理后，才能切片。