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广西制备液相-武汉赛尔夫科技公司

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随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常为2.5~7.5(2~8),太高的pH值会使硅胶溶解,太低的pH值会使键合的脱落。有报告新商品柱可在pH 1.5~10范围操作。

正相色谱法与反相色谱法比较表

正相色谱法 反相色谱法

固定相*性 高~中 中~低

流动相*性 低~中 中~高

组分洗脱次序 *性小先洗出 *性大先洗出






低压色谱(LPLC)柱压一般低于5bar(或75psi)。 低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成,可以连续化,实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的,长度一般为240-440mm,内径为10-40mm。 对于大多数在紫外区有吸收的物质,光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂,粒径一般为40-60μm。

HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:

速度快—通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。

分辨率高—可选择固定相和流动相以达到分离效果。

灵敏度高—紫外检测器可达0.01ng,制备液相,荧光和电化学检测器可达0.1pg。

柱子可反复使用—用一根色谱柱可分离不同的化合物。

样品量少,容易回收—样品经过色谱柱后不被*,可以收集单一组分或做制备。




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