DAPI染色液（即用型） 细胞核染料 江苑生物

产品简介

DAPI，即4’,6-联脒-2-，4’,6-Diamidino-2-phenylindole, dihydrochloride，也称DAPI dihydrochloride，分子式为C₁₆H₁₅N₅·2HCl，分子量为350.25，CAS号28718-90-3。

DAPI是一种常用的可以穿透细胞膜的蓝色荧光核酸染料，和双链DNA结合后可以产生比自身强20多倍的荧光。和EB（ethidium bromide）相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。DAPI的更大激发波长为340 nm，更大发射波长为488 nm；DAPI和双链DNA结合后，更大激发波长为358 nm，更大发射波长为461 nm。DAPI也可对RNA进行染色，染色机理是其可以选择性嵌入“AU序列”并发出荧光。相比DAPI-dsDNA (Ex/Em=358 nm/461 nm)，DAPI-RNA具有较长的更大发射波长（500 nm），其荧光亮度仅有DAPI-dsDNA的20%。尽管DAPI不能通过膜，但可以通过提高浓度使之进入细胞。

DAPI具有很高的光白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA，叶绿体DNA，病毒DNA，MicroplaDNA以及染色体DNA。DAPI典型的蓝色荧光特性使其非常普遍的搭配其他绿色或红色荧光染料用于细胞生物学多色荧光标记技术，因此也常作为核酸和染色体的复染剂用于细胞凋亡检测、RNA原位杂交、直接或间接检测等领域，其染色后可用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。

本产品为溶液，分为2种形式，浓度为5 mg/mL和即用型，即用型产品可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。5 mg/mL DAPI需稀释后使用。用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10 µg/mL。

保存条件

冰袋运输，4℃避光保存，保质期6个月；-20ºC避光保存，至少1年有效。

注意事项

1．DAPI对有一定刺激性，请注意适当防护。

2．荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

3．为减缓荧光淬灭可以使用荧光淬灭封片液。

4．低浓度的DAPI不容易穿透细胞膜。

5．本产品仅用于科学研究，不得用于临床诊断，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内。

6．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明

对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI染色。

1．对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。

对于悬浮细胞：至少加入样本体积3倍的染色液，混匀。

2．室温放置3-5 min。

3．吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5 min。

4．直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长360 nm，发射波长460 nm。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。