南京细胞实验-英瀚斯-细胞实验

细胞实验介绍——细胞运动能力检测：

细胞划痕实验是体外模拟细胞迁移能力和*能力快捷的检测方法。在长满的细胞培养板或者培养皿中，细胞实验，沿着中线使用移液器枪头或者其他硬物划1-3条平行的直线，去除中线的细胞，细胞在0h、12h、24h后，观察细胞往中线迁移情况，判断细胞迁移能力。

一般流程：细胞接种培养-划痕-不同时间点拍照

细胞迁移和侵袭实验是体外模拟细胞迁移和侵袭能力的检测方法。使用不同孔径的聚碳酸酯膜transwell小室放入培养板中，将细胞接种于小室中，利用培养液成分的差异诱导细胞运动，检测细胞的迁移和侵袭能力的差异。

一般流程：transwell小室准备-细胞接种-细胞培养-transwell小室染色-显微镜拍照

结果示例：

图 A 细胞划痕实验图；B，C 细胞迁移和侵袭实验图

干细bao培养诱导分化

干细bao是一类具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞，理论上具有无限分裂能力，在特定条件下，可分化成特定*。通常改变* ES 细胞不分化状态的培养条件， ES 细胞就可以分化成多种细胞类型。ES 细胞具有的这种能力在体外增殖并保持未分化状态及其多向分化潜能的生物学特性，使其广泛应用于生物学研究的各个领域， 它的潜在医学应用价值已成为世界范围内研究的热点。目前，已报道的自ES细胞诱导分化的细胞主要包括胰岛细胞、*细胞、肝细胞、*细胞、脂肪细胞、心肌细胞、内皮细胞、上皮细胞、成骨细胞、软gu细胞和黑素细胞等。

细胞实验介绍——流式细胞术检测细胞周期和凋亡

流式细胞术检测细胞周期：

细胞周期：指细胞从*次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。G0/G1期：有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，进入下一个细胞周期，或者进入静止期（G0期），而G0期从DNA含量上无法与G1期区分，细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。S期：DNA开始合成，细胞核内DNA的含量介于G1期和G2期之间。G2期和M期：当DNA成为4倍体时，细胞进入G2期。G2期细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M期。

PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，南京细胞实验，从而计算出各个期的百分含量。

一般流程：细胞收集-70%酒精固定过夜-PI染色-流式细胞仪检测。

细胞凋亡：细胞凋亡的早期就有细胞膜表面*损发生。*损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在之前，观察细胞实验，检测PS的表达，能反映早期凋亡。AnnexinV是Ca2 依赖的磷脂结合蛋白，对PS有很高的亲和性，并且可以与暴露于细胞外的PS相结合。利用这一原理，可以将AnnexinV标记荧光来识别早期的细胞凋亡。通常利用AnnexinV-FITC和碘化丙啶(PI)来区分凋亡和坏死细胞。PI的膜通透性很差，因而只能标记坏死的细胞。

一般流程：细胞收集-PI-AnnexinV标记-流式细胞仪检测。

结果示例：

图 A 细胞周期检测图；B 细胞凋亡检测图