猪血管生成素1ELISA*盒

 ANG-1,<*n>猪血管生成素1ELISA*盒

l 本*盒用于体外定量检测****、血浆、*、细胞上清及相关液体样本中<*n>猪血管生成素1（ANG-1）的含量。

l <*n>有效期：6个月

l 保存条件：2-8℃

l 本*盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断

<*n>实验原理

<*n>*盒采用双*一步夹心法酶联****吸附试验（ELISA）。往预先包被<*n>猪血管生成素1（ANG-1<*n>）捕获*的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测*，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成****终的*。颜色的深浅和样品中的<*n>猪血管生成素1（ANG-1）呈<*n>正相关。用*在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

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<*n>样本处理及要求

1.  <*n>****<*n>：全血标本请于室温放置2<*n>小时或<*n>4℃<*n>过夜后于<*n>1000g<*n>离心<*n>20<*n>分钟，取上清即可检测，或将标本放于<*n>-20℃<*n>或<*n>-80℃<*n>保存，但应避免反复冻融。
2.  <*n>血浆<*n>：可用EDTA<*n>或肝素作为*凝剂，标本采集后<*n>30<*n>分钟内于<*n>2 - 8°C 1000g<*n>离心20<*n>分钟，或将标本放于-20℃<*n>或<*n>-80℃<*n>保存，但应避免反复冻融。

3.  *匀浆<*n>：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)<*n>冲洗*，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将*剪碎。将剪碎的*与对应体积的<*n>PBS<*n>（一般按<*n>1:9<*n>的重量体积比，比如<*n>1g<*n>的*样品对应<*n>9mL<*n>的<*n>PBS<*n>，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在<*n>PBS<*n>中加入蛋白酶*）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解*细胞，可以对匀浆液进行超声*碎，或反复冻融。****后将匀浆液于<*n>5000<*n>×<*n>g<*n>离心<*n>5~10<*n>分钟，取上清检测。

4.  <*n>细胞培养物上清或其它生物标本<*n>：1000g<*n>离心<*n>20<*n>分钟，取上清即可检测，或将标本放于<*n>-20℃<*n>或<*n>-80℃<*n>保存，但应避免反复冻融。
<*n>注：标本溶血会影响****后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。