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包含制冷剂的内部容器由不锈钢材质制成或铝合金由于大部分的延展性丧失在低温下其他相对价格较低的材料。通常是这样覆盖多层或粉末类型的绝缘材料。内部容器和绝缘体将被封闭在由碳钢或不锈钢制成的真空夹套中；钢铁被用于保护容器和绝缘材料的情况下一场火灾。

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把微生物细胞混悬于含保护剂（20%甘油，10%DMSO等）的液体培养基中（也可把含菌琼脂块直接浸入含保护剂的培养液中），分装入耐低温的安瓿瓶中后，作缓慢预冷，然后移至液氮罐中的液相（-196℃）或气相（-156℃）作长期超低温保藏。

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用于长期贮存时，则需要定期补充液氮，补充时一般应在液氮剩余量为总容量的三分之一为宜。

放进或取出冷冻物品时，要尽量使罐口打开时间短，以减少液氮消耗，也不要把提筒完全提出来。