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聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA为模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同参与下,将该段DNA扩增至足够数量,以便进行结构和功能分析。PCR检测方法在临床上快速诊断*chuan染病等方面具有****为重要的意义。PCR原理用于扩增位于两段已知序列之间的DNA片段,类似于天然DNA的copy过程。


PCR检测*盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

1.引物3"端的碱基,特别是****末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

2引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子很有好处。

3引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,PCR快速检测*多少钱,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,PCR快速检测*盒,且可增加引物之间形成二聚体的机会。


PCR检测*盒反应五要素:参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,PCR快速检测*价钱, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

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