3730xl测序仪|测序仪|拓普塞斯

测序仪注意事项

北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年，是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司，我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。如测序仪、合成仪、扩增仪、蛋白纯化仪、自动工作站和气相色谱质谱联用仪等，公司尤其在 ABI 各种型号的*分析仪方面有丰富的维修维护经验。

1．abi pri* 310*分析仪是****精密仪器，需专人操作、管理和维护。2．本实验测序pcr反应的总体积是5μl，而且未加矿物油覆盖，所以pcr管盖的密封性很重要，除加完*后盖紧pcr管盖外，选用pe公司的pcr管。如pcr结束后pcr液小于4～4.5μl，则此pcr反应可能失败，不必进行纯化和上样。3．作为测序用户来说，只需提供纯化好的dna样品和引物，一个测序pcr反应使用的模板不同，需要的dna量也就不同，pcr测序所需模板的量较少，3730xl测序仪，一般pcr产物需30～90ng，单链dna需50～100ng，双链dna需200～500ng，dna的纯度一般是a260nm/a280nm为 1.6～2.0，用去离子水或三蒸水溶解dna，不用te缓冲液溶解。引物用去离子水或三蒸水配成3.2pmol/μl较好。4．本实验使用的测序*盒是bigdye荧光标记终止底物循环测序*盒，一般可测dna长度为650bp左右。本仪器dna测序准确度为 (98.5±0.5) %，测序仪，仪器不能辨读的碱基nlt;2%，所需测定的长度超过了650bp，则需设计另外的引物。为保证测序更为准确，可设计反向引物对同一模板进行测序，相互印证。对于n碱基可进行人工核对，有时可以辨读出来。为****测序的准确度，根据星号提示位置，可人工分析该处图谱，对该处碱基作进一步核对

北京拓普塞斯生物专注测序仪销售与维修服务，主营产品型号：有373测序仪、377测序仪、310测序仪、3700测序仪和3100测序仪型等dna测序仪。欢迎您致电联系我们获取更多优惠~~~

测序仪之pcr测序反应

北京拓普塞斯生物技术有限公司成立于 2008 年，是湖北三七七生物技术有限公司的全资子公司，我司自成立至今始终致力于各种类型的生物学仪器的销售、维修维护等服务。如测序仪、合成仪、扩增仪、蛋白纯化仪、自动工作站和气相色谱质谱联用仪等，公司尤其在 ABI 各种型号的*分析仪方面有丰富的维修维护经验。

pcr测序反应(1) 取0.2ml的pcr管，用记号笔编号，将管插在颗粒冰中，按下表加*：所加* 测定模板管 标准对照管bigdye mix 1μl 1μl待测的质粒dna 1μl －pgem-3zf ( ) 双链dna － 1μl待测dna的正向引物 1μl －m13(-21)引物 － 1μl灭菌去离子水 2μl 2μl总反应体积5μl，不加轻矿物油或石蜡油，盖紧pcr管，3500测序仪，用手指弹管混匀，稍离心。(2) 将pcr管置于9600或2400型pcr仪上进行扩增。98℃变性2min后进行pcr循环，pcr循环参数为96℃ 10s，3730测序仪，50℃ 5s，60℃4min，25个循环，扩增结束后设置4℃保温。

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