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PCR仪、济南君意生物、触屏PCR仪

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对于PCR反应而言,PCR仪,****重要的莫过于温度控制的准确性。而对于梯度PCR,温度准确性的要求似乎更高。下面就跟随君意生物一起来了解一下梯度PCR仪


通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次反应就可以筛选出****适合的退火温度,优化实验,在节约成本的同时也节约了时间。传统的梯度PCR仪的加热模块由分别控温的2个Peltier元件组成,对它们设置不同的温度,通过热传导可形成温度梯度。不过,由于均匀的金属加热模块两端设置的高温和低温之间的热学相互作用,无法实现*的线性梯度。实际上,均匀的金属加热模块上的温度更多呈S形曲线而非线性梯度,荧光定量PCR仪,列间的温度差异不一致使其难以确定优化后的真实退火温度,尤其是在优化难以处理的试验时。


PCR仪是一种利用DNA聚合酶对特定*做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁*。因而,在PCR仪使用时对于环境要求很高,为了避免实验未完成前可能出现的任何污染反应液的情况,应该了解关于反应液受到污染时,反应液处理方法: 

紫外照射法:未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液进行紫外照射,注意事项与方法同上述UV照射法; 

内切酶法:选择识别4个碱基的内切酶(如Msp I和Taq I等),PCR仪,可同时选择几种,以克服用一种酶只能识别特定序列的缺陷,室温作用1h 后加热灭活进行PCR; 

DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室温反应30 min后加热灭活,触屏PCR仪,然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是不需要知道污染DNA的序列; 

g射线辐射法:1.5kGy的辐射可完全*0.1ng*组DNA,2.0 kGy可*104拷贝的质粒分子,4.0 kGy仍不影响PCR,但高于此限度会使PCR扩增效率下降。引物可受照射而不影响PCR,g射线是通过水的离子化产生自由基来*DNA的。 


PCR仪的使用要求很高,因此不允许在实验过程中出现一丝错误,尤其是任何与实验有关的物品的污染情况。上述关于PCR仪反应液污染情况的及时处理方法一定能帮助您在实验中出现类似情况时及时处理。


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