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生物切片、求精教学(已认证)、****生物切片

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①新鲜恒冷箱冷冻切片,厚6~8μm,平贴在盖玻片上。

②滴染法:将有冷冻切片的盖玻片(标本面朝上)平放于预热好的培养皿中(底部垫一湿滤纸),滴加孵育液至全部覆盖*,于37℃温箱中孵育45~60分钟(肝,心肌*15分钟即可)。

③于生理盐水中冲洗二次(轻晃,以防脱片)。

④10%*生理盐水固定10分钟。

⑤15%酒精浸洗5分钟(换二次)。

⑥甘油明胶封片。

结果:酶活性强处呈蓝色颗粒(双甲沉淀),酶活性较低时形成紫红色单甲。在光镜下,该酶活性于肝小叶内分布呈明显分带现象,周边带强于*带。在心肌细胞纵切面,酶活性颗粒沿心肌细胞长轴整齐排列,相邻心肌细胞的空白处为闰盘。



切片   (1)切片刀或一次性切片刀片必须锋利。使用切片刀时,必须精心磨备(在低倍目镜下确认刀刃完好口);使用一次性切片刀片时,应及时更新。  (2)载玻片必须洁净、光明。   (3)将切片刀或刀片安装在持刀座上(以15°为宜)。  (4)将蜡块固定于持撑持器上,并调整蜡块和刀刃至适当位置(刀刃与蜡块表面呈5°夹角)。  (5)细心移动刀座或蜡块撑持器,使蜡块与刀刃接触,旋紧刀座和蜡块撑持器。  (6)修块(粗切):用右手匀速旋转切片机轮,修切蜡块表面至包埋此中的社团块完备地全数切到。修块粗切片的厚度为15~20μm。[注意:对于医嘱再次深切片(特别是在原切片中发现了有意义病变而进行的深切片),应尽量少修块,以尽量好地获患上有关病变的连续性。]


临时片与*片

切片的材料有时不作*之保存,或无法*保存,则称为临时片。采用制作临时片之原因,可能是因为材料无法*保存,或是为了观察方便,仅以简单的方式处理材料。另外可能是采用的化学药剂易变化,无法制成*片。

另一个制作临时片的原因是必须作*观察,利用的是*或细胞能短暂时间内存活于玻片之中。例如花粉活性测试之制片。

*片则是存留证据标本(玻片),作为研究的凭证。依据概分,程序为收取材料。固定材料。切成薄片。染色。封片。


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